Ультрацентрифугирование – разделение объектов размером менее 100 нм (белков, вирусов, высокомолекулярных соединений, субклеточных частиц, синтетических полимеров) с помощью работы ультрацентрифуги, выполняющей поставленные задачи за счет использования центробежных сил.
Метод воздействия на исследуемое вещество дает возможность делить на отдельные фракции обрабатываемое вещество, вычислять их молекулярный вес, составлять представление об их форме.
Ультрацентрифугирование классифицируют на зонально-скоростное (в градиенте плотности) и равновесное.
При зонально-скоростном ультрацентрифугировании используют преформированный градиент плотности глицерина, сахарозы (обрабатываемый раствор распределяют по верхнему слою градиента).
Активация центрифуги запускает процесс передвижения разделяемых частиц к дну сосуда. Достигая слоя градиента той же плотности, что и они, отделенные фракции прекращают движение и происходит их концентрация в данной точке. За счет этого, объекты разной плотности размещаются на разных участках градиента.
При равновесном ультрацентрифугировании в качестве градиента используют тяжелые металлы - соли хлорида или сульфата цезия. Их ионы при запуске центрифуги устремляются ко дну пробирки.
Через некоторое время работы устройства создается равновесие между силами, создающими градиент и противостоящим ним. При таких условиях отделяемые фракции начинают устремляться на участки градиента с аналогичной плотностью. В результате весь обрабатываемый объект разделяется на отдельные фракции.